Résumé | Nous avons mis au point un procédé de culture en alimentation programmée, robuste, fiable et conforme aux bonnes pratiques de fabrication (BPF) pour la production de protéines recombinantes d’hémagglutinine (rHA) dans des cellules expresSF™. Afin de maximiser le rendement final de production de rHA sans modifier le protocole de récolte et de traitement en aval de la protéine, nous avons optimisé la solution et la stratégie d’alimentation, ainsi que la densité cellulaire au moment de l'infection. Nous avons élaboré une solution d’alimentation simple et stable ainsi qu’un régime d’alimentation rigoureux permettant de doubler ou de tripler, selon le baculovirus utilisé, la production volumétrique tout en augmentant la productivité spécifique par rapport à un mode de culture discontinue. La protéine recombinante a pu être récoltée selon un procédé fort simple après la lyse des cellules cultivées en mode semi-continu, puis purifiée par une série d’étapes de chromatographie. Dans l’ensemble, nous avons pu observer le maintien de l’augmentation du rendement en rHA tout au long du procédé. Ainsi, en utilisant cinq baculovirus différents codant la rHA et en effectuant douze cycles de production dans des bioréacteurs de 2 L et 10 L, nous avons démontré l’efficacité du procédé de culture semi-continue sur le plan du rendement, de la reproductibilité et de la production à grande échelle. |
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