| Résumé | Dans cette étude, les auteurs démontrent leur prédiction à l'effet que le transporteur du nucléotide adénine (ANT2) mitochondrial intervient dans le transport de l'ATP. Que l'ANT2 produit par recombinaison intervienne dans l'absorption de l'ATP dans des protéoliposomes confirme l'identification basée sur les séquences de la protéine comme membre de la famille des transporteurs du nucléotide adénine. Les auteurs confirment sa présence dans des extraits de membranes de levure, lorsqu'on l'exprime chez le Saccharomyces cerevisiae, avec un marqueur C-terminal His6. On a solubilizé la protéine recombinante avec du Triton X-100 et on l'a enrichie par chromatographie d'affinité sur métal immobilisé, avant de la reconstituer dans des liposomes. Les auteurs ont ainsi confirmé la fonctionnalité de la protéine reconstituée en démontrant l'absorption du pyridoxal 5'[³H]ATP sensible au phosphate. Des essais de transport montrent une absorption cinétique de premier ordre de l'ATP, avec une valeur Km approximative de 15 µmol·L–¹. Les essais de compétition indiquent que la protéine reconstituée possède une plus grande affinité pour l'ATP. En général, ces résultats montrent que l'ANT2 de l'Arabidopsis constitue un transporteur du nucléotide adénine. |
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