| DOI | Trouver le DOI : https://doi.org/10.1016/j.ab.2009.12.007 |
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| Auteur | Rechercher : Boucher, Cyril1; Rechercher : St-Laurent, Gilles1; Rechercher : Jolicoeur, Mario; Rechercher : De Crescenzo, Gregory; Rechercher : Durocher, Yves1 |
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| Affiliation | - Conseil national de recherches du Canada. Institut de recherche en biotechnologie du CNRC
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| Format | Texte, Article |
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| Sujet | Alkaline phosphatase; Biotechnology; Epidermal growth factor; Peptides; Phosphatase; Protein; Surface plasmon resonance |
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| Résumé | Nous proposons une méthode de détection de protéines au moyen d’un transfert Western ou buvardage. La méthode tire parti de l’interaction avec affinité élevée qui se produit entre deux peptides de conception de novo, les spires E et K. Comme système modèle, le facteur de croissance épidermique (EGF) étiqueté au moyen d’une spire K a été révélé au moyen de phosphatase alcaline secrétée (SeAP) étiquetée avec une spire E (SeAP-spire E) ainsi qu’avec une spire E biotinylée. Pour cela, nous avons d’abord produit du groupement SeAP-spire E purifié et vérifié sa capacité d’interagir avec des peptides étiquetés par spire K au moyen de la biodétection par résonance plasmonique de surface. Nous avons démontré que la détection de protéines au moyen du groupement biotine-spire E était plus spécifique que la SeAP-spire E. Nous avons ensuite montré que notre méthode est aussi sensible que les méthodes classiques de détection qui font appel au groupement nickel-acide nitrilotriacétique-peroxydase de raifort (Ni-NTA-HRP), anti-His-HRP ou anti-EGF. Dans l’ensemble, nos résultats indiquent que le système faisant appel au couple spires E/K est une bonne solution de remplacement pour la détection de protéines par transfert Western. -¬ 2009 |
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| Date de publication | 2010 |
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| Dans | |
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| Langue | anglais |
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| Publications évaluées par des pairs | Oui |
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| Numéro du CNRC | NRCC 52745 |
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| Numéro NPARC | 14223465 |
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| Identificateur de l’enregistrement | 08ca95e5-c824-4164-9c0b-116ea2217207 |
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| Enregistrement créé | 2010-11-05 |
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| Enregistrement modifié | 2020-04-17 |
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